枯草芽孢桿菌在固態(tài)發(fā)酵飼料中的應(yīng)用研究進(jìn)展
摘要:在畜牧業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域,益生菌常被用作飼料添加劑以改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能和免疫性能。益生菌可調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群、預(yù)防疾病,是良好的抗生素替代品。以枯草芽孢桿菌為代表的益生菌受到了廣泛關(guān)注,再結(jié)合固態(tài)發(fā)酵技術(shù)發(fā)酵飼料使得飼料的品質(zhì)得以提高。文章介紹了枯草芽孢桿菌及固態(tài)發(fā)酵技術(shù),概述了枯草芽孢桿菌在固態(tài)發(fā)酵飼料中的作用及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用。最后,總結(jié)了枯草芽孢桿菌在固態(tài)發(fā)酵飼料中的發(fā)展前景及相關(guān)建議,以期為枯草芽孢桿菌在發(fā)酵飼料的生產(chǎn)上提供參考。
隨著對環(huán)境保護(hù)、污染治理以及食品安全等問題的重視程度逐漸加大,無抗替抗養(yǎng)殖的呼聲越來越高。所以,需要尋找抗生素的替代品來控制和預(yù)防致病性細(xì)菌的定植。微生態(tài)制劑是很好的替代品,微生態(tài)制劑中的枯草芽孢桿菌,具有調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞、保護(hù)宿主細(xì)胞的功能,以支持動(dòng)物健康。枯草芽孢桿菌可形成內(nèi)生孢子、革蘭氏陽性細(xì)菌,由于其特有的特性,它們能夠?qū)χ参镞M(jìn)行定植,產(chǎn)生孢子、生物膜、各種蛋白酶類物質(zhì)以及短鏈抗真菌肽,并誘導(dǎo)植物激素的合成,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。枯草芽孢桿菌由于能夠產(chǎn)生孢子而被用作動(dòng)物飼料中的益生菌補(bǔ)充劑。與其他益生菌相比,它的熱穩(wěn)定性和在低pH值下生存的能力具有很大優(yōu)勢。此外,發(fā)酵方式也尤為重要,發(fā)酵方式主要包括固態(tài)發(fā)酵、液體發(fā)酵。現(xiàn)在使用較多的發(fā)酵方式是固態(tài)發(fā)酵。許多工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品,如麥麩、豆粕、米糠、玉米粉、馬鈴薯皮、酒糟等,常被選為固態(tài)發(fā)酵的基質(zhì),用來做固態(tài)發(fā)酵飼料。一些產(chǎn)孢子的微生物,在固態(tài)發(fā)酵系統(tǒng)提供的環(huán)境下會(huì)有更好的性能和更高的產(chǎn)率。本文主要概述了枯草芽孢桿菌在固態(tài)發(fā)酵技術(shù)下發(fā)酵飼料所產(chǎn)生的作用、在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用、前景及相關(guān)建議。
1枯草芽孢桿菌概述
枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)是典型的有益菌,具有控制不同類型細(xì)胞發(fā)育的能力。枯草芽孢桿菌被生物技術(shù)公司用于工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)。枯草芽孢桿菌屬革蘭氏陽性菌,形成孢子的微生物,能抑制大多數(shù)有害菌的繁殖。枯草芽孢桿菌是好氧菌,具有極強(qiáng)的抗逆性,能在較高酸堿和溫度等惡劣環(huán)境中存活。
枯草芽孢桿菌可以在動(dòng)物腸道內(nèi)出芽生長,產(chǎn)生多種酶類物質(zhì),對動(dòng)物生長有很好的促進(jìn)作用,在防治疾病方面也有著良好的效果。研究表明,枯草芽孢桿菌能產(chǎn)生胞外酶,如蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、植酸酶和脂肪酶等,這些酶能夠水解植物飼料細(xì)胞的細(xì)胞壁,使細(xì)胞里面的營養(yǎng)物質(zhì)釋放出來,并能消除飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,減少抗?fàn)I養(yǎng)因子對動(dòng)物消化利用的障礙。在國內(nèi),枯草芽孢桿菌被人體攝入,可以緩解腹瀉和建立健康的腸道微生物群。
枯草芽孢桿菌飼料添加劑也可調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群,對動(dòng)物健康生長有很大益處。此外,芽孢桿菌也有一定的生物修復(fù)用途,可以減少含氮廢物,從而改善環(huán)境條件和水質(zhì)。因此,有人稱它為“菌中之王”。
2固態(tài)發(fā)酵
2.1 固態(tài)發(fā)酵技術(shù)簡介
固態(tài)發(fā)酵(Solid-State Fermentation,SSF)是一種生物加工技術(shù),是指微生物在濕固體顆粒上的生長,顆粒間的空隙存在少量液態(tài)水和連續(xù)氣相。SSF在食品發(fā)酵工業(yè)和飼料發(fā)酵工業(yè)中有著悠久的應(yīng)用歷史。在亞洲,SSF用于生產(chǎn)面包、奶酪、曲酒、醬油、豆豉和腐乳等食品。此外,利用SSF技術(shù)已經(jīng)生產(chǎn)了許多重要的產(chǎn)品,如氨基酸、酶、有機(jī)酸、紡織和生物燃料等。近幾年來,SSF技術(shù)以其優(yōu)于液態(tài)發(fā)酵(Submerged Fermentation,SmF)的諸多優(yōu)勢而獲得了廣泛的應(yīng)用。SSF相較于SmF有許多優(yōu)點(diǎn),在SSF過程中,很少有廢棄物產(chǎn)生,靠固體顆粒間隙中存留的空氣向微生物提供氧氣,有產(chǎn)量高、投資低、耗能低、污染小等一系列優(yōu)點(diǎn)。芽孢桿菌在SSF中的生長過程中,芽孢的積累往往伴隨著基質(zhì)的消化和生物活性代謝物的釋放。因此,SSF可以降低抗?fàn)I養(yǎng)因子(如豆粕、棉籽粕和菜籽粕中),提高飼料的營養(yǎng)價(jià)值。
2.2 固態(tài)發(fā)酵的主要步驟
一般來說,SSF的主要步驟和SmF基本相同,SSF的主要步驟如圖1所示。
3枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料的作用及在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用
3.1 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料的作用
3.1.1 在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生酶類和營養(yǎng)物質(zhì)
芽孢桿菌能夠分泌大量的胞外酶,正是因?yàn)榭莶菅挎邨U菌在發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的各種酶類使蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等一些大分子營養(yǎng)物質(zhì)可被枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料所降解,促進(jìn)動(dòng)物腸道吸收,提高消化率。
史艷麗等利用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕,結(jié)果表明,抗原蛋白殘留率、粗蛋白均顯著高于空白對照組(P<0.05)。Dai等用枯草芽孢桿菌,通過SSF提高豆粕(SBM)的營養(yǎng)價(jià)值和生物活性,粗蛋白質(zhì)、可溶性蛋白質(zhì)、總酚、黃酮類化合物含量均有所增加。閆亞婷等以玉米為飼料原料,通過正交試驗(yàn)優(yōu)化其發(fā)酵條件,優(yōu)化后玉米粉淀粉含量下降,分解率達(dá)到37.76%,可溶性糖含量提高了1.72倍。豆渣是大豆工業(yè)產(chǎn)生的主要農(nóng)業(yè)廢棄物。為了水解豆渣并釋放營養(yǎng)物質(zhì),Mok等采用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵法發(fā)酵豆渣,研究表明,用枯草芽孢桿菌發(fā)酵豆渣提高了其營養(yǎng)含量。用枯草芽孢桿菌發(fā)酵的豆渣,總氨基酸含量由未發(fā)酵的(3.04±0.14)mg/g增加到(5.41±1.21)mg/g。發(fā)酵后,總脂肪酸含量從(153.04±5.10)mg/g增加到(166.78±2.41)mg/g,發(fā)酵后的抗氧化劑含量(DPPH)也提高了6.4倍。由此可見,枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料可產(chǎn)生豐富的酶、多肽、有機(jī)酸、氨基酸等益生性物質(zhì)。
3.1.2 抑菌作用
枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)生多種生物活性肽,包括抗菌肽、免疫活性肽和抗氧化肽。李萌等用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕產(chǎn)抗菌脂肽以提高脂肽產(chǎn)量。結(jié)果表明,在最優(yōu)條件下,抗菌脂肽的抑菌率的實(shí)際值為(75.62±0.36)%,抑菌率提升了將近一半。
3.2 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用
3.2.1 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料在仔豬中的應(yīng)用
枯草芽孢桿菌中的有益菌可產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì),如消化酶、維生素、有機(jī)酸、小肽和促生長因子等,可顯著提高仔豬的生產(chǎn)性能。洪文探究了枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵工藝的條件,并以不同劑量的枯草芽孢桿菌對斷奶仔豬生長性能、腹瀉發(fā)病率等情況進(jìn)行研究,結(jié)果表明,高劑量組仔豬的平均日增重和飼料效率比陰性對照組高,而抗生素組,中劑量組和高劑量組之間則無顯著差異(P<0.05)。所有益生菌組和抗生素組腹瀉指數(shù)低于陰性對照組(P<0.05)。張煜用新型枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕降解豆粕抗原蛋白,中試發(fā)酵豆粕確定發(fā)酵條件,在仔豬日糧中添加10%的發(fā)酵豆粕,促進(jìn)仔豬對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高仔豬生長性能。
3.2.2 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料在畜禽中的應(yīng)用
歐榮娣等利用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵米糠,拌入日糧中飼喂臨武鴨,試驗(yàn)結(jié)果表明,與對照組相比,日糧中添加枯草芽孢桿菌可有效提高臨武鴨平均日增重,降低料肉比和死亡率。文靜等研究肉雞日糧中添加枯草芽孢桿菌對其生長性能的影響,結(jié)果表明,在基礎(chǔ)日糧中添加0.75g/kg的枯草芽孢桿菌制劑肉雞的日增重顯著高于基礎(chǔ)日糧(P<0.05)。
3.2.3 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用
水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)一直在穩(wěn)步增長,特別是水產(chǎn)養(yǎng)殖中的蝦。然而,對蝦養(yǎng)殖中病害的爆發(fā)阻礙了對蝦產(chǎn)業(yè)發(fā)展的步伐。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用抗生素或化療藥物來控制疾病,導(dǎo)致了耐藥性和消費(fèi)者不接受的問題。枯草芽孢桿菌作為益生菌,可成為預(yù)防對蝦養(yǎng)殖病害爆發(fā)的良好替代物。
在人工飼養(yǎng)條件下,Zuenko等研究了鯉魚腸道食糜中消化酶活性、細(xì)菌屬比,結(jié)果表明,加入活菌枯草芽孢桿菌對鯉魚腸道食糜中微生物群落的大小和結(jié)構(gòu)、某些消化酶的活性、消化率和增重都有積極的影響。鯉魚腸道食糜中微生物總數(shù)比對照組高13%,胸骨中微生物總數(shù)是對照組的3.5倍。在所研究的魚類中,消化酶活性的提高的同時(shí)會(huì)使氮、氨和尿素含量的減少。這可能是因?yàn)槟c道微生物對蛋白質(zhì)有更好的吸收,更多地利用氮代謝物來合成自己的生物量。試驗(yàn)組鯉魚平均日增重比對照組高25%,平均日增重35%。
4結(jié) 論
固態(tài)發(fā)酵飼料產(chǎn)量高、價(jià)格低、操作簡單,益生菌枯草芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)品更加安全、營養(yǎng)更加豐富、更容易讓動(dòng)物消化吸收。利用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料可以顯著增強(qiáng)動(dòng)物免疫力,大大降低動(dòng)物的發(fā)病率和死亡率。在飼料中添加枯草芽孢桿菌可以增強(qiáng)動(dòng)物食欲,明顯提高日增重、縮短飼養(yǎng)周期、提高了養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。所以,隨著研究工作的進(jìn)一步深入,以及人們綠色、安全和環(huán)保意識(shí)的不斷增強(qiáng),枯草芽孢桿菌在發(fā)酵飼料中的應(yīng)用前景將會(huì)更加廣闊。未來,可以對復(fù)合菌種多加研究,以期找到最佳的發(fā)酵工藝條件、最佳配比及用量。
對枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵飼料相關(guān)建議如下:①應(yīng)選擇優(yōu)良生產(chǎn)的菌種,提高菌株定植能力;②固態(tài)發(fā)酵飼料原料種類繁多,應(yīng)對飼料原料的質(zhì)量和穩(wěn)定性加已把控;③不應(yīng)只注重試驗(yàn)研究而忽略實(shí)際應(yīng)用研究,獲得的試驗(yàn)結(jié)論要與生產(chǎn)實(shí)際相關(guān)聯(lián);④要嚴(yán)格符合發(fā)酵飼料相關(guān)的使用標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范。

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